发布单位:北京中检维康生物技术有限公司 发布时间:2022-5-22
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elisa生物试验是一种敏感性高,特---强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在医类检验的各领域中。elisa检测试剂盒适用于体外定性检测人或血浆中的抗人类戊型(hev)--- igm 抗体elisa检测。
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1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时---白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二(抗)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.然后用ddw洗涤。
其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
2. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
3. 底物a应挥发,避免长时间打开盖子。底物b对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取od值。
4. 加入试剂的顺序应一致,以---所有反应板孔温育的时间一样。
5. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品或标准品od超出正常范围
1 错误的样品或标准品的稀释 完全按照说明书稀释
2 偶联抗体浓度过高 按照说明书调整到的浓度
3 tmb底物孵育时间过长 调整到合适的孵育时间
4 样品或标准品污染 避免污染
5 错误的孵育时间或温度