elisa试剂盒的应用技术

elisa检测试剂盒应用定性夹心检测技术，用合成的hev多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是型hev---------酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该---的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在hev igm，这些就会与hev 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特---和样品中的其它成份。然后加入羊抗人igm-hrp（辣根---化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与孵育结合上的hev igm相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入tmb底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有hev igm和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入---溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量o.d.值,按照本hev igmelisa试剂盒的测试标准, o.d.值大于或等于cut-off值的样品被认为是初试阳性。

elisa试剂盒的操作方法——间接法

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1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；

2.次日洗涤3次；

3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；

4.（同时---白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；

6.然后用ddw洗涤。

其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。

elisa试剂盒检测过程中的注意事项

elisa实验通用规则